La PCR (Polymerase Chain Reaction)
La PCR classique ou conventionnelle
La PCR (Polymérase Chain Reaction)
est une technique de Biologie Moléculaire mise au point en 1985 par Karry Mullis. Cette méthode permet d'amplifier in vitro une partie spécifique d'un acide nucléique donné (ADN ou ARN) afin d'en obtenir une quantité suffisante pour le détecter. La technologie PCR en temps réel permet une quantification de la cible.
N cycles permettent d'obtenir 2N copies d'ADN.
Deux amorces (sens et anti-sens) spécifiques s'hybrident à l'acide nucléique cible en présence d'un excès de désoxynucléotides et une Taq polymérase (ADN polymérase stable à haute température) synthétise le brin complémentaire.
Au cours d'un cycle, l'ADN bicaténaire subit plusieurs transformations :
- dénaturation en deux brins monocaténaires
- hybridation des amorces sur la cible
- Synthèse d'un nouveau brin à partir des amorces par la Taq polymérase.
Il en résulte deux ADN bicaténaires.
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L’ensemble de la gamme ADIAVET classique peut-être utilisé sur les appareils suivants : Applied Biosystem : 9700 ; 9600 ; 2400 ; 2700 MJ research : PTC 100, PTC 200 Eppendorff : Mastercycleur gradient (mode tube) Hybaid : sprint Techne: Touchgene Liste non exhaustive pour les thermocycleurs PCR Classique. |